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Plateforme "GAGs – Glyco-Mix "

Publié le 9 décembre 2015 Mis à jour le 7 décembre 2017

La plateforme GLYCO-mix se situe à l’interface de la chimie et de la biologie et propose son expertise dans le domaine des analyses quantitatives et fonctionnelles des Glycosaminoglycannes.

Plateforme GAGs – Glyco-Mix

DESCRIPTION

La plateforme GLYCO-mix se situe à l’interface de la chimie et de la biologie et propose son expertise à l’ensemble de la communauté scientifique publique et privée dans le domaine des analyses quantitatives et fonctionnelles des Glycosaminoglycannes (GAG) sous forme de collaborations ou de prestations.

COMPETENCES ET EXPERTISE

Domaine d’expertise scientifique et technique :
• Analyse structurale et fonctionnelles des GAG

Compétences et savoir-faire :
• Extraction des GAGs à partir de tissus, cellules, biomatériaux ou fluides d’intérêt d’origine humaine ou animale (cerveau, muscle, cœur, tumeur, LCR, sang…)
• Quantification des Glycosaminoglycannes (GAGs), Heparan Sulfates (HS), Chondroitin Sulfate (CS)
• Composition des chaînes de GAGs par caractérisation des disaccharides de CS ou HS par HPLC-fluorimétrie
• Détermination par ELISA des capacités de liaisons des GAGs extraits à des protéines dites « Heparin-Binding » telles que les facteurs de croissance
• Synthèse de mimétiques d’Heparan Sulfates (HS)

MATERIELS DISPONIBLES

1 système HPLC dédié à l’analyse des disaccharides des GAGs composé de :
• Autosampler réfrigéré (Midas Spark)
• Pompe pré-colonne, tête céramique – 4 voies (Knauer)
• Pompe post-colonne, 4 voies (Knauer)
• Colonne échangeuses d’anions (SAX, Sigma)
• Réacteur post-colonne (10-150°C)
• Détecteur Fluorimètre (RF20-A Shimadzu)
• Système piloté par le logiciel ClarityChrom (Knauer)

1 Système HPLC pour la détermination de la taille des GAGs naturels ou synthétiques:
• Chaine complète Alliance e2695 (Waters)
• Colonne d’exclusion (OH pak, Shodex)
• Détecteur UV/visible et Réfractomètreice

Lecteurs de plaque: Modèle Infinite M1000, Tecan piloté par le logiciel Magellan
• Détection de fluorescence, absorbance, luminescence
• Techniques de FRET, BRET

OFFRE ET SERVICES PROPOSES

Applications potentielles de la plateforme :
• extraction de GAG à partir de tout tissu humain ou animal
• analyse des GAGs dans un contexte matriciel ou non

Besoins auxquels répond la plateforme :
• Développements d’approches thérapeutiques innovantes

EXEMPLES DE PRESTATIONS REALISEES

Académiques :
En Partenariat avec l’Université de Rotterdam des Pays-Bas
• Analyse quantitative des GAGs issus de sang et de myocarde de rats au cours du vieillissement
• Etude structure-fonction par la définition du profil des disaccharides des HS du myocarde et l’analyse de la capacité de ces mêmes GAGs à lier des facteurs de croissance

En Partenariat avec l’Université de Sao Paulo du Brésil et de l’Institut du Cerveau et de la Moëlle à l’Hopital de la Pitié de Paris
Etude de la capacité des GAGs de l’hippocampe chez le sujet âgé comparé à ceux du sujet adulte à lier des facteurs de croissance après leur analyse quantitative.

En Partenariat avec l’Université de Limoges
• Analyse quantitative des GAGs 
• Etude du profil de disaccharide des CS par HPLC dans des cellules, modèle de maladies à prion, génétiquement modifiées avec délétion de la sulfotransférase CHST8.

Industriels :
• rapport d’expertise d’analyse de GAGs pour l’industrie pharmaceutique
• comparaison de lot d’extraction de CS